浮游生物計(jì)數(shù)框/計(jì)數(shù)管是淡水及海洋浮游生物定量分析中重要的計(jì)數(shù)工具,廣泛應(yīng)用于藻類、原生動(dòng)物、輪蟲等微型水生生物的顯微鏡下定量計(jì)數(shù)工作。在湖泊富營養(yǎng)化評(píng)價(jià)、水華預(yù)警監(jiān)測以及水產(chǎn)養(yǎng)殖餌料生物調(diào)查等領(lǐng)域,這些計(jì)數(shù)器具直接關(guān)系到數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)的準(zhǔn)確性和可比性。深入理解其結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)特點(diǎn)并掌握規(guī)范的操作使用技術(shù),對(duì)于保障浮游生物定量研究的可靠性具有重要意義。
從結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)來看,浮游生物計(jì)數(shù)框通常采用有機(jī)玻璃或不銹鋼材質(zhì)制造,外形為長方形平板狀,標(biāo)準(zhǔn)尺寸為長五十毫米、寬二十毫米,中間開有一個(gè)精確的矩形計(jì)數(shù)區(qū),常見規(guī)格有兩種。第一種是二十毫米乘二十毫米的正方形計(jì)數(shù)區(qū),面積為四百平方毫米,容積為零點(diǎn)一毫升,框體深度為零點(diǎn)二五毫米,這種規(guī)格適用于沉淀法濃縮后的樣品計(jì)數(shù)。第二種是五十毫米乘二十毫米的長方形計(jì)數(shù)區(qū),面積為一千平方毫米,容積為一毫升,深度為一毫米,這種規(guī)格適用于大型浮游動(dòng)物或直接取樣的樣品計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)框的底面刻有精細(xì)的方格網(wǎng)線,將整個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)劃分為若干個(gè)等面積的小方格,例如將二十毫米乘二十毫米區(qū)域劃分為五乘五共二十五個(gè)大方格,每個(gè)大方格再細(xì)分為若干小方格。這些方格網(wǎng)線為顯微鏡視野下的定位和計(jì)數(shù)提供了明確的坐標(biāo)參考。浮游生物計(jì)數(shù)管則是一種圓柱形玻璃或透明塑料管,通常與計(jì)數(shù)框配合使用。計(jì)數(shù)管長度一般為十至二十厘米,內(nèi)徑均勻,管身帶有刻度標(biāo)記,較小刻度為毫升。管的一端為錐形收縮出口,可安裝滴管尖嘴或開關(guān)閥門,另一端為加樣口。計(jì)數(shù)管的主要功能是將濃縮后的樣品進(jìn)行精確分樣和定量吸取,然后均勻注入計(jì)數(shù)框中進(jìn)行顯微鏡觀察。
在操作使用技術(shù)方面,浮游生物計(jì)數(shù)框的使用應(yīng)遵循樣品混勻、加樣靜置、視野計(jì)數(shù)和數(shù)據(jù)換算四個(gè)核心步驟。首先將采集并固定好的浮游生物樣品經(jīng)過沉淀濃縮或過濾濃縮后,收集至定量瓶中定容到已知體積,例如三十毫升或五十毫升。計(jì)數(shù)前用吸管反復(fù)吹打樣品瓶底部,使沉淀在瓶底的生物體重新懸浮均勻。用微量移液器或計(jì)數(shù)管準(zhǔn)確吸取零點(diǎn)一毫升或一毫升樣品,從計(jì)數(shù)框邊緣的加樣口緩慢注入,注意避免產(chǎn)生氣泡。蓋上專用的蓋玻片后靜置五至十分鐘,使生物體自然沉降到計(jì)數(shù)框底部的方格面上。將計(jì)數(shù)框放置在光學(xué)顯微鏡的載物臺(tái)上,先用低倍鏡掃描整個(gè)計(jì)數(shù)區(qū),了解生物分布情況,再根據(jù)生物大小選擇合適倍率進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)的原則是對(duì)于大型藻類或浮游動(dòng)物采用全片計(jì)數(shù)法,即對(duì)計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)所有個(gè)體進(jìn)行統(tǒng)計(jì);對(duì)于小型藻類則采用視野計(jì)數(shù)法,隨機(jī)選取十至二十個(gè)視野,統(tǒng)計(jì)每個(gè)視野中目標(biāo)生物的數(shù)量,然后按視野面積與計(jì)數(shù)區(qū)總面積的比例換算成全片數(shù)量。計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)沿方格網(wǎng)線逐行進(jìn)行,避免重復(fù)計(jì)數(shù)或遺漏。每個(gè)樣品至少計(jì)數(shù)兩片,取平均值作為該樣品的計(jì)數(shù)結(jié)果。較后根據(jù)計(jì)數(shù)值、計(jì)數(shù)框容積、樣品濃縮倍數(shù)以及原始水樣體積等參數(shù),換算出單位體積水樣中浮游生物的數(shù)量,通常以每升多少個(gè)表示。
在維護(hù)保養(yǎng)方面,使用后的計(jì)數(shù)框應(yīng)立即用蒸餾水沖洗,然后用軟布輕輕擦干,切忌使用硬物刮擦方格網(wǎng)線以免損傷刻度精度。計(jì)數(shù)管使用后需用蒸餾水反復(fù)抽洗,管壁不得殘留生物體碎片或固定液結(jié)晶。長期不用時(shí)應(yīng)將計(jì)數(shù)框和計(jì)數(shù)管放入專用盒內(nèi)保存,避免碰撞和劃傷。定期用顯微鏡檢查計(jì)數(shù)框方格網(wǎng)線的清晰度,如發(fā)現(xiàn)網(wǎng)線模糊或脫落應(yīng)及時(shí)更換。通過規(guī)范的樣品處理、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)挠?jì)數(shù)操作和科學(xué)的換算方法,浮游生物計(jì)數(shù)框和計(jì)數(shù)管能夠?yàn)樗鷳B(tài)學(xué)研究提供準(zhǔn)確可靠的定量基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。